一、方法原理    

试样中六六六、滴滴涕经提取、净化后用毛细管柱气相色谱分离与测定，以保留时间定性，外标法定量。电子捕获检测器对于负电极强的化合物具有极高的灵敏度，利用这一特点，可分别测出痕量的六六六、滴滴涕。不同异构体和代谢物可同时分别测定。

二、主要仪器设备

1.上海仪电分析气相色谱仪：具电子捕获检测器。

2.旋转蒸发仪。

3.氮气浓缩器。

4.匀浆机。

5.调速多用振荡器。

6.离心机。

7.植物样本粉碎机。

三、试剂

1 丙酮CH₃COCH₃：分析纯，重蒸。

2 正己烷n-C₆H₁₄：分析纯，重蒸。

3 石油醚：沸程30℃~60℃，分析纯，重蒸。

4 苯C₆H₆：分析纯。

5.硫酸H₂SO₄：优级纯。

6.无水硫酸钠Na₂SO₄：分析纯。

7.硫酸钠溶液20g/L。

8.农药标准品：六六六α-HCH、β- HCH、γ- HCH、δ- HCH、p,p’-DDE 、o,p’-DDT p,p’-DDD 和p,p’-DDT纯度不低于98%。

9.农药标准储备液：精密称取α-HCH、β- HCH、γ- HCH、δ- HCH、p,p’-DDE 、o,p’-DDT p,p’-DDD 和p,p’-DDT各10mg，溶于苯中，分别移于100mL容量瓶，以苯稀释至刻度，混匀，浓度为100mg/L，贮存于冰箱中。

10.农药混合标准工作液：分别量取上述各标准储备液适量于同一容量瓶中，以正己烷稀释至刻度配成一系列混合标准溶液。

四、操作步骤

1、标准曲线的绘制

2、样品处理

2.1.试样制备

   谷类制成粉末，其制品匀浆；蔬菜、水果及其制品制成匀浆；蛋白去壳制成匀浆；肉品去皮、筋后，切成小块，制成肉糜；鲜乳混匀待用； 混匀待用。

2.2提取

2.2.1食品匀浆类：称取具有代表性的各类食品样品匀浆20g，加水5mL视样品水分含量加水，使总水量约20mL，加丙酮40mL，振荡30min，加氯化钠6g，摇匀。加石油醚30mL，再振荡30min，静置分层。取上清液35mL经无水硫酸钠脱水，于旋转蒸发器中浓缩至近干，以石油醚定容至5mL，加浓硫酸0.5mL净化，振摇0.5min，于3000r/min离心15min，取上清液进行GC分析。

2.2.2.粉末样品：称取具有代表性的2g粉末样品，加石油醚20mL，振荡30min，过滤，浓缩，定容至5mL，加浓硫酸0.5mL净化，振摇0.5min，于3000r/min离心15min，取上清液进行GC分析。

2.2.3.食用油样品：称取具有代表性的食用油样品0.5g，以石油醚溶解于10mL刻度试管中，定容至刻度。加1.0mL浓硫酸净化，振摇0.5min，于3000r/min离心15min，取上清液进行GC分析。

3、测定

3.1.色谱参考条件

3.1.1.色谱柱：HP-5石英弹性毛细管柱，30m-0.32mm-0.5μm或等效柱。

3.1.2.柱温：程序升温

           90℃1min^40℃/min170℃^3℃/min200℃2min^20℃/min250℃15min

3.1.3.进样口温度：250℃

3.1.4.检测器：电子捕获检测器ECD，温度：250℃。

3.1.5.尾吹：45mL

3.1.6.分流进样，分流流量：5mL/min，进样量：1μL。

3.1.7.柱前压：0.05MPa。

4、色谱分析

    分别吸取1μL混合标准液及试样净化液注入气相色谱仪，记录色谱图，以保留时间定性，以试样和标准的峰面积定量。

5、色谱图

    色谱图出峰顺序依次为α-HCH、β- HCH、γ- HCH、δ- HCH、p,p’-DDE 、o,p’-DDT p,p’-DDD 和p,p’-DDT。

6、结果计算

   试样中各农药的含量按下式进行计算：

式中：

X——试样中各农药的含量，单位为毫克每千克mg/kg；

m1——被测样液中各农药的含量，单位为纳克ng；

V1——样液进样体积，单位为微升μL；

f——稀释因子稀释倍数

m——试样质量，单位为克g；

V2——样液最后定容体积，单位为毫升mL。

计算结果保留两位有效数字。

7、精密度

    在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。