一、原理

    二氧化硫被四氯汞钠吸收液吸收后，生成稳定的络合物，再与甲醛和盐酸副玫瑰苯胺作用，并经分子重排后，生成紫红色的络合物。颜色的深浅与二氧化硫的浓度成正比，可以比色测定。

二、仪器及试剂

仪器：分光光度计

（1）四氯汞钠吸收液：称取氯化汞（HgCl₂）27.2，氯化钠11.7克，溶于水中并稀释至1000毫升，放置过夜，过滤后使用。

（2）显色剂：融解盐酸福玫瑰苯胺100毫克于200毫升水中，加40毫升浓盐酸，定容至500毫升，置于棕色瓶中。

（3）2％甲醛溶液：吸取37-40％甲醛5毫升于水中，并稀释至100毫升。

（4）1％淀粉指示剂。

(5) 冰醋酸。

(6) 蛋白质沉淀剂。

a)饱和硼砂溶液：溶解约25克硼砂于500毫升水中．

b)硫酸锌溶液溶解150克硫酸锌于500毫升水中。

 (7)0.1N碘溶液。

 (8)0.1N硫氏硫酸钠标准溶液。

 (9) 二氧化硫标准溶液：称取0.5克亚硫酸氢钠溶于200毫升四氯汞钠吸收液中，放置过夜。上清液用定量滤纸过滤备用，按下法进行标定。

取10毫升亚硫酸氢钠四氯汞钠溶液于250毫升碘价瓶中，加水100毫升，加入0.1N碘溶液20毫升，冰醋酸5毫升，摇匀，用0.1N硫代硫酸钠溶液滴定到淡黄色，加入1％淀粉指示剂5-6滴，继续滴定至无色。空白试验于250毫升碘价瓶中加A300毫升水，按上述步骤同样操作。

SO₂(毫克/毫升)＝(V₁-V₂)/10×N×32.03

V₁；空白消耗硫代硫酸钠标准溶液的量(m1)

V₂：标准消耗硫代硫酸钠标准溶液的量(m1)

N：硫代硫酸钠标准溶液的当量浓度

三、操作方法

 (1) 样品处理：称取经捣碎蘑菇样品20克，加入饱和硼砂溶液5毫升，硫酸锌2毫升，搅拌均匀，移入100毫升容量瓶中，加水至刻度。过滤，滤液供测定用(滤液必须澄清，否则要重复过滤数次)。

 (2) 标准曲线的绘制：吸取每毫升相当于2微克的二氧化硫标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0毫升于25毫升比色管中，各加入2％甲醛溶液1毫升，显色剂1毫升，另分别依次加入10、9、8、7、6、5毫升吸收液，混匀，静置15分钟，于分光光度计580毫微米波长下测定

 (3) 样品分析：吸取滤液5毫升，加人吸收剂5毫升，2％甲醛溶液1毫升，显色剂1毫升，混匀，静置15分钟，于分光光度计580毫微米波长下测定光密度。根据测得的光密度，从标准曲线查得相应的二氧化硫的含量。

四、计算               

S02：(毫克／公斤)＝C/W×1000

C；相当于标准的量(毫克)。

W：测定时所取样品溶液相当于样品的量(克)。

五、注意事项

 (1)最适反应为20-25℃，温度低灵敏度低，故标准管与样品管需在相同温度下显色。

 (2)温度为15-16℃，放置时间需延长为25分钟，颜色稳定20分钟。

 (3)盐酸副玫瑰苯胺中的盐酸用量对显色有影响，加人盐酸量多，显色浅，加入量少，显色深，所以要按操作进行。

 (4) 甲醛浓度在0.15-0.25％时，颜色稳定，故选择0.2％甲醛溶液。

 (5) 颜色较深的样品，可用l0％活性炭脱色。

 (6) 测定粉丝，粉条中的二氧化硫时，样品要浸泡30分钟。

 (7) 样品加入四氯汞钠吸收液于100毫升容量瓶中，加水至刻度，摇匀。此溶液中的二氧化硫含量在24小时之内很稳定。