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可见分光光度计的工作原理

时间:2015-11-21 9:49:23      阅读:2191

一、可见分光光度计

可见分光光度计(又名可见光度计、分光光度计)是可见光分光光度法能够进行定量测量(标准曲线测量,可对物质进行浓度直读);OD值直接测量(吸光度、透过率和能量等直读);动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描(可以对某一种物质进行全波段扫描,分析物质的特征波长,判断实验过程的误差);多波长测试(可以对物质同时进行多个波长的测试,分析物质的相关特性);还有可以进行DNA/蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等等。

广泛应用于食品、药品、电力、生物研究、教学科研、化学化工、质量监督、水质环保和商检等各大领域。

二、可见分光光度计原理

基于物质对不同波长的光的选择性吸收,不同的物质都有各自的吸收光谱,当光经色散后的光谱通过某一溶液时,其中某些波长的光就会被溶液吸收。根据朗伯-比尔定律,当一束平行单色光照射到一定浓度的均匀溶液时,光强的减小程度和入射光的强度,溶液的浓度以及所透过溶液的长度成正比,其公式为:

T=I/I0 A=LogI0/I=Kbc  

其中:T:透色比 I0:入射光强 A:吸光度 I:头色光强度 K:吸收系数,1/mol/com b:液层厚,cm C:溶液的浓度,mol/l  

光的吸收定律不仅适用于有色溶液,也适用于无色溶液及气体和固体的非散射均匀体系,不仅适用于可见光的单色光,也适用于紫外和红外光区的单色光,但应注意,此定律仅适用于单色光和一定范围的低浓度溶液。溶液浓度过大时,透光性质发生变化,从容使溶液对光的吸收度与溶液浓度不成正比关系,波长交宽的混合光影响光的互补吸收,也会使测定产生误差。

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