一、微生物检验的意义
微生物检验是生产中的重要环节,微生物的检测无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要意义,其范围与对象广泛,涉及食品、医疗等多个领域。
具体如下:
1、衡量动植物性产品卫生质量的重要指标之一,也是判定被检产品能否食用的科学依据之一。
2、通过微生物检验,可以判断产品加工环境及产品卫生环境,能够对产品被微生物污染的程度作出正确的评价,为各项卫生管理工作提供科学依据,提供传染病和人类、动物和食物中毒的防治措施。
3、微生物检验是以贯彻“预防为主”的卫生方针,可以有效地防止或者减少食物中毒、人畜共患病的发生,保障人民的身体健康;同时,它在提高产品质量、避免经济损失、保证出口等方面具有政治上与经济上的重要意义。
二、微生物检验的范围与对象
微生物检验的范围如下:
1.生产环境的检验:车间用水、空气、地面、墙壁等。
2.各种产品的原、辅料检验:包括食用动物、谷物、添加剂等一切原辅材料。
3.各类产品加工、储藏、销售诸环节的检验:包括食品从业人员的卫生状况检验、加工工具、运输车辆、包装材料的检验等。
4.产品的检验:重要的是对出厂产品、可疑产品及食物中有毒食品的检验.
微生物检验的对象:7类
1、食品
2、化妆品
3、药品
4、一次性用品及其他生活用品
5、应施检疫的出口动物产品
6、环境
7、有关国际条约或其他法律、法规规定的强制性卫生检验的进出口商品
三、微生物检测方法
疏水网膜法(HGMF):采用疏水网膜过滤样品,将捕获了被检微生物的疏水网膜上倾入适当的琼脂,经一定时间培养后即可计数
直接荧光过滤膜技术(DEFT):将样品经特殊滤膜过滤后,经吖啶橙染色,利用紫外线显微镜来快速测定活菌数。
葡萄糖苷酶荧光法:通过在培养基中加入指示剂、色素、荧光物质,成为快速检验大肠菌群的常用方法。
四、微生物检查中的MPN法和CFU法
MPN (most probable number)法即最近似数法,也称为最大可能数法,是食品检验中常用的方法。其生化反应基础为乳糖发酵,革兰阴性菌的无芽胞杆菌,如,大肠菌群,一般在37℃、24h发酵乳糖、产酸产气。利用此原理,将供试液加到发酵培养基中,37℃培养24h。若不产气,则报告控制菌阴性;若产气,则需划线接种于平板上,37℃培养24h后,观察菌落形态、革兰染色和重发酵验证。
优点:操作简便、灵敏度较高,时间短,可直接观察试管得出结论,若发酵培养基不产气,24h即可报告控制菌阴性。
缺点: 要求样品具有均一性,适合检验液体样品,且只能用于检验在发酵培养基中产气的菌种。注意事项:需选择合适的稀释度和接种量。
CFU(colony forming units)法即平板计数法,是食品和药品检验中常用的方法。原理为lg或lmL样品中所含的活菌数量,通过将处理后的样品在一定条件下培养后计算生长出来的菌落数(CFU),即在一定体积的细菌培养液在固态培养基上形成的菌落数。液体样品可直接稀释成供试液,固体样品需在灭菌的生理盐水中浸泡制成供试液。将不同稀释度的供试液吸取1mL,放入灭菌的平皿内,再倾注融化的营养琼脂,待琼脂凝固后,翻转平皿,37℃培养4d,计算平皿内的菌落数。CFU法应用广泛,但检验过程必须严格无菌,以防污染杂菌,而且检验所需时间较长,同时也需选择合适的稀释度和接种量。
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