一、液相色谱柱的相关参数

1、表面积

颗粒外表面和内部孔表面的总和，以m2/gram表示。

高表面积对于多组份样品的分离具有较强的保留能力，柱容量和分离度。表面积低的填料通常能迅速达到平衡状态，对于梯度淋洗尤为重要。

2、孔径

颗粒的孔或腔的平均尺寸，范围60-10,000Å。

大孔的填料颗粒可以延长溶质大分子在填料表面滞留的时间，达到充分分离，改善峰形；样品MW≤4000,选择80Å的孔径，样品MW＞4000选择300Å的孔径

3、碳覆盖率

对色谱分离的影响，与基体物质相连的键合相的量。

高碳覆盖率可以提高分辨率，分析时间长。低碳覆盖率缩短运行时间。

4、封端/封尾

封端对色谱分离的影响，使用较短烷烃链键合游离硅羟基（二次键合）

封端就是减轻待测组份与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应而引起的色谱峰拖尾现象，对于极性样品，未封端与经过封端处理的色谱柱在选择性上有明显差异。

5、粒径

1.8um~3.5um便于快速分离，5um是行业标准，7um是制备柱。

二、如何冲洗液相色谱柱

1、对于反相色谱柱的冲洗

用以下溶剂至少各25mL冲洗色谱柱(分析柱)：不含缓冲盐的流动相、100%甲醇、100%乙腈、75%乙腈+25%异丙醇、100%异丙醇、100%二氯甲烷、100%己烷。

注意若使用己烷或二氯甲烷冲洗色谱柱，则在重新使用反相流动相以前，必须用异丙醇冲洗色谱柱。

2、对于正相色谱柱的冲洗

用以下溶剂至少各50mL冲洗色谱柱(分析柱)：50%甲醇+50%三氯甲烷、100%乙酸乙酯。