一、高效液相色谱法的特点
高效液相色谱法是20世纪60年代末在经典液相色谱的基础上发展起来的一种现代色谱分析方法,历史上曾出现过不同的叫法,如高压液相色谱(HPLC)、高速液相色谱(HSLC)和高分辨液相色谱(HRLC)。就分离原理而言,HPLC与经典柱层析(色谱)没有本质的区别,但由于采用了高压输液泵、高效微粒固定相和高灵敏度检测器,HPLC在分析速度、分离效率、检测灵敏度和操作自动化方面,都达到了可与GC相比的程度,并保持了样品适用范围广、流动相种类多和便于制备的柱层析优点,在生物工程、制药工业、食品工业、环境监测和石油化工等领域获得了广泛的应用。
HPLC的特点如下:
①样品适用范围广;
②分离效率高;
③检测灵敏度高;
④分析速度快;
⑤样品回收方便。
二、高效液相色谱法的分类
HPLC的分类方法有多种,比较常见的有三种。
(1)按照分离机理分类
①吸附色谱②分配色谱③离子交换色谱(IEC)④体积排阻色谱(SEC)⑤亲和色谱(AC)
(2)按照色谱柱洗脱动力学分类
①洗脱法②前沿法③置换法
(3)按照分离目的分类
①分析液相色谱②制备液相色谱
三、HPLC分析常用的样品处理技术
包括粉碎、冷冻干燥、气体萃取(顶空分析和吹扫-捕集)、溶剂萃取(回流或索氏萃取,加压溶剂萃取)、固相萃取、固相微萃取、超临界流体萃取、微波萃取、超声波萃取、微透析、衍生化、膜分离、蒸馏、吸附、离心、过滤、浓缩和溶解等。
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