一、无菌室的一般要求
1、需要建立无菌室管理制度
2、保持良好的卫生：相对湿度40%---60%，温度20—22 ℃，最好安装空调。
3、无菌室不得进行其他工作，非操作所使用的物件一律不得放入，检后的余样不得存放。
4、紫外灯的使用期限一般为300小时，要记录使用时间，到期更换
二、器材及场所的灭菌消毒
微生物检验用器材及场所必须进行灭菌或消毒处理，不同的对象采用不同的处理方法。
1．高压蒸汽灭菌: 工作服、口罩、稀释液等，置高压杀菌锅内，一般采用121℃灭菌半小时,当然不同的培养基有不同的要求,应分别处理。
2．火焰灭菌： 接种针、接种环等可直接火焰灭菌。
3．高温干燥灭菌： 各种玻璃器皿、注射器、吸管等，置于干燥箱中160℃灭菌2小时。
4．一般消毒: 无菌室内的凳、工作台、试管架、电子天平、待检物容器或包装均无法进行灭菌，必须用其他方法进行消毒处理，采用2%石炭酸或来苏儿水溶液擦拭消毒，工作人员的手也用此法进行消毒。
5．空气的消毒： 开启紫外灯照射30―60分钟 即可。
三、准备工作
1．先进行无菌室空间的消毒，开启紫外灯30―60分钟。
2．检验用的有关器材， 搬入无菌室前必须分别进会灭菌消毒。
3．操作人员必须将手清洗消毒，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋，才能进入无菌室。
4．进入无菌室后再一次消毒手部，然后才进行检验操作。
四、操作过程注意事项
1．动作要轻，不能太快，以免搅动空气增加污染；玻璃器皿也应轻取轻放，以免破损污染环境。
2．操作应在近火焰区进行。
3．接种环、接种针等金属器材使用前后均需灼烧，灼烧时先通过内焰，使残物烘干后再灼烧灭菌。
4．使用吸管时，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必须用洗耳球操作。
5．观察平板时不好 开盖，如欲沾取菌落检查时，必需靠近火焰区操作，平皿盖也不能 大开，而是上下盖适当开缝。
6．进行可疑致病菌涂片染色时，应使用夹子夹持玻片，切勿用手 直接拿玻片，以免造成污染，用过的玻片也应置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗涤。
7．工作结束，收拾好工作台上的样品及器材，最后用消毒液擦拭工作台。
