气相色谱仪常用于挥发性有机物的分析,要达到快速、准确分析的目的,操作者必须具备良好的操作技能,下面是气相色谱仪的一些操作技巧,供大家参考。
上海仪电分析GC128气相色谱仪
一、加热
由于气相色谱仪的生产厂家的不同,给定温度的方式也不相同,对于用微机设数法或拨轮选择法给定温度,一般是直接设数或选择合适给定温度值加以升温,而如果是采用旋钮定位法,则有技巧可言。
1、过温定位法
将温控旋钮调至低于操作温度约30℃处,给气相色谱仪升温,当过温至约为操作温度时,配台温度指示和加热指示灯,再逐渐将温控旋钮调至台适位置。
2、分步递进定位法
将温控旋钮朝升温方向转动一个角度,升温开始,指示灯亮。当温度基本稳定时,再同向转动温控旋钮,开始继续升温,如此递进调节、直至恒温在工作温度上。
二、点火
氢焰气相色谱仪,开机时需要点火,有时因各种原因致使熄火后也需要点火。然而我们经常会遇到点火不着的情况。下面介绍两种点火技巧:
1、加大氢气流量法
先加大氢气流量,点着火后,再缓慢调回工作状况,此法通用。
2、减少尾吹气流量法
先减少尾吹气流量,点着火后,再调回工作状况。此法适用于仍用氢气作载气,用空气作助燃气和尾吹气情况。
三、气比的调节
氢焰气相色谱仪三气的流量比,有关资料均建议为氮气∶氢气∶空气=1∶1∶10。但由于转子流量计指示流量的不准确性,事实上谁会去苛求这个配比呢?为各气施以良好匹配,目的是既有高的检测器灵敏度又能有较好的分离效果,还不容易熄火。
1、氮气流量的调节
在色谱柱条件确定后,样品组分分离效果的好坏,氮气的流量大小是决定因素。调节氮气流量时,要进样观察组分分离情况,直至氮气流量尽可能大且样品组分有较好分离为止。
2、氢气和空气流量的调节
氢气和空气流量的调节效果,可以用基流的大小来检验。先调节氢气流量,使之约等于氮气的流量,再调节空气流量。在调节空气流量时,要观察基流的改变情况。只要基流在增加,仍应相向调节,直至基流不再增加不止。最后,再将氢气流量上调少许。
四、进样技术
在气相色谱分析中,一般是采用注射器或六通阀门进样。在考虑进样技术的时候,主要是以注射器进样为对象。
1、进样量
进样量与气化温度、柱容量和仪器的线性响应范围等因素有关,也即进样量应控制在能瞬间气化,达到规定分离要求和线性响应的允许范围之内。
①排除注射器里所有的空气
用微量注射器抽取液体样品进,只要重复地把液体抽入注射器又迅速把其排回样品瓶,就可做到这一点。还有一种更好的方法,可以排除注射器里所有的空气。那就是用计划注射量的约2倍的样品置换注射器3~5次,每次取到样品后,垂直拿起注射器,针尖朝上。任何依然留在注射器里的空气都应当跑到针管顶部。推进注射器塞子,空气就会被排掉。
②保证进样量的准确
用经置换过的注射器取约计划进样量2倍左右的样品,垂直拿起注射器,针尖朝上,让针穿过一层纱布,这样可用纱布吸收从针尖排出的液体。推进注射器塞子,直到读出所需要的数值。用纱布擦干针尖。至此准确的液体体积已经测得,需要再抽若于空气到注射器里。如果不慎推动柱塞,空气可以保护液体使之不被排走。
2、进样方法
双手拿注射器,用一只手(通常是左手)反针插入垫片,注射大体积样品(即气体样品)或输入压力极高时,要防止从气相色谱仪来的压力把柱塞弹出(用右手的大拇指)。让针尖穿过垫片尽可能深的进入进样口,压下柱塞停留1~2秒钟,然后尽可能快而稳地抽出针尖(继续压住柱塞)。
3、进样时间
进样时间长短对柱效率影响很大,若进样时间过长,遇使色谱区域加宽而降低柱效率。因此,对于冲洗法色谱而言,进样时间越短越好,一般必须小于1秒钟。
五、毛细管色谱柱的选择
1、柱长度的选择
分辨率与柱长的平方根成正比,在其他条件不变的情况下,为取得加倍的分辨率需有4倍的柱长,较短的柱子适于较简单的样品,尤其是由那些在结构、极性和挥发性上相差较大的组分组成的样品。
一般来说:15m的短柱用于快速分离较简单的样品,也适于扫描分析;30m的色谱柱是最常用的柱长,大多数分析在此长度的柱子上完成;50m、60m或更长的色谱柱用于分离比较复杂的样品。应该注意,柱长增加分析时间也增加。
2、柱内径的选择
柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量,小口径柱比大口径柱有更高柱效,但柱容量更小。
0.25mm:具有较高的柱效,柱容量较低,分离复杂样品较好;
0.32mm:柱效稍低于0.25mm的色谱柱,但柱容量约高60%;
0.53mm:具有类似于填充柱的柱容量,可用于分流进样,也可用于不分流进样。
当柱容量是主要考虑因素时(如痕量分析),选择大口径毛细管柱较为合适。
3、液膜厚度的选择
液膜厚度影响柱子的保留特性和柱容量、厚度增加,保留也增加。
0.0.2μm:薄液膜厚度的毛细管柱比厚液膜的毛细管柱洗脱组分快,所需柱温度低,且高温下柱流失较小,适用高沸点的化合物的分析。
0.25~0.5μm:常用的液膜厚度。
厚液膜:对分析低沸点的化合物较为有利。
4、固定相的选择
不同的固定相对不同的分析物的影响不同,根据相似相溶原理,性质越相近,固定相对其的流动阻力越大,其保留时间越长。色谱柱就是通过这个原理将不同性质的混合物相互分开的。
气相色谱柱的分离效果主要取决于其固定相、柱长度、柱内径、液膜厚度这几个因素,从原理上讲,这几个因素相同的柱子,其分离效果也是完全一样的。