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液相色谱柱的安装和清洗

时间:2022-4-19 14:03:12      阅读:778

液相色谱仪是指利用混合物在液固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。

上海仪电分析LC210液相色谱仪

一、液相色谱柱的安装

标准SOP应为:取A管路放入流动相瓶中→拧松泵头→流速由0ml/min逐渐升至10ml/min,观察尾液是否呈瀑布状流出,持续10秒→拧紧泵头→流动相呈抛射状从安装色谱柱的一端喷出,观测是否呈抛物线状,持续5秒→流速逐步降至1.0ml/min →安装色谱柱,待20秒后,流动相从色谱柱另一端呈泉水状涌出再安装另一端→手握两端螺丝帽,拧紧。

以上安装顺序遵循的是:逐级排放气泡和仪器内存留的洗液,使得安装后气泡极难混入。

二、实验后色谱柱的清洗

1、最为常用的C8柱、C18

流动相仅为乙腈-水或甲醇-水时,继续冲洗30分钟,流速1.0ml/min,柱温保持试验时温度,即可。

水相中有无机盐、表面活性剂或三乙胺、高氯酸等物质时,先采用纯水(或含有2%甲醇),冲洗A管路(试验采用哪个管路,就要从头到尾冲洗该管路),时间30分钟(如流动相中有表面活性剂,适当增加时间),流速1.0ml/min,柱温可较试验温度高出5~10℃。随后更换成20%甲醇再冲洗30分钟,流速1.0ml/min,柱温箱加热装置关闭。结束后取下色谱柱放置阴凉处。

2、其他类型色谱柱

查询或联系厂家获取如何科学合理地使用与清洗保存该类型色谱柱的方法,切勿盲动,否则导致色谱柱性能急剧下降。


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