一、应用背景
随着城市化、工业化的迅速发展，人们生活水平有着很大的提高，但是环境问题却日趋严重。在众多的环境问题中，水污染问题尤为突出，成为当今人们关注的一个焦点。
二、应用原理
一般情况下，铁以Fe3+状态存在，盐酸羟胺可将其还原为Fe2+：
2Fe3+ + 2NH2OH·HCl = 2Fe2+ + N2 + 4H+ 2H2O + 2Cl-
Fe2+与邻二氮菲在pH为2～9的条件下生成稳定的1：3橘红色络合物，在508n处有最大吸收，ε508=101 104L/（mol·cm），lgK=21.3。
测定时，控制溶液酸度在pH=5左右为宜。酸度高时反应慢，酸度太低，离子则容易水解，影响显色。
实验计算公式：吸光度A=εmaxLC，其中：
εmax—摩尔吸光系数（表示1mol/L的溶液，在液层厚度为1cm时的吸光度，其单位为L/（mol·cm），C—溶液中铁的浓度，单位为mol/L ，L—溶液的厚度，单位cm。
三、应用仪器
分光光度计，ph计，电子分析天平，量筒，容量瓶，胶头滴管，吸量管，比色管，烧杯，玻璃棒，滤纸，ph试纸等。
四、应用试剂及配制
1、100g/L盐酸羟胺溶液的配制
称取10g盐酸羟胺晶体溶于100mL蒸馏水中。若不好溶先溶于乙醇再稀释。
2、1.5g/L邻二氮菲溶液的配制
称取邻二氮菲(AR)0.3750g于烧杯中，加少量蒸馏水和浓盐酸4滴溶解后，移至250mL容量瓶中，加蒸馏水定容。
3、NaAc（1mol/L）
称取8.2g NaAc固体于烧杯中加少量蒸馏水溶解，移至100mL容量瓶中，加水稀释。
4、 NaOH（1mol/L）
称取4.0g NaOH固体于烧杯中加少量蒸馏水溶解，移至100mL容量瓶中，加水稀释。
5、HCl（6mol/L）
取浓盐酸（1+1）稀释。
6、100μg/mL或1.791mmol/L的铁标准溶液
称取0.2059g分析纯NH4Fe(SO4)2.12H2O于100mL烧杯中，加入6mol/LHCl溶液20mL和少量水，溶解后转移至1L容量瓶中，稀释至刻度并摇匀，10μg/mL的铁标准工作溶液（准确吸取100μg/mL的铁标准溶液10mL于100mL容量瓶中，加入6mol/LHCl溶液2mL，用水稀释至刻度并摇匀。
五、应用过程
1、吸收曲线的绘制和测量波长的确定
用吸量管吸取0、1.0mL铁标准工作溶液于两个50mL容量瓶中，各加1mL盐酸羟胺溶液并摇匀，再加入2mL邻二氮菲、5mLNaAc溶液，用水稀释至刻度并摇匀。放置10min后，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在波长440～560nm之间，每隔10nm测定一次吸光度，在最大吸收波长附近（490～520），每隔5nm测定一次吸光度。以波长λ为横坐标、吸光度A为纵坐标绘制吸收曲线，从吸收曲线上选择测定铁的适宜波长，一般选择最大吸收波长。
2、溶液酸度的选择
取7个50mL容量瓶，分别加入1ml铁标准工作溶液，用吸量管再分别加入1mL盐酸羟胺，摇匀，再加入2mL邻二氮菲，摇匀。用5mL吸量管分别加入1mol/LNaOH溶液0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、2.5ml和3.0mL，用水稀释至刻度，摇匀。放置10min后，用1cm比色皿，以蒸馏水为参比，在选择的波长下测定各溶液的吸光度，同时用pH计测量各溶液的pH值。以pH值为横坐标、吸光度A为纵坐标绘制吸光度A与pH值关系的酸度影响曲线图，确定测定铁的适宜酸度范围。
3、显色剂用量的确定
在7个50mL容量瓶中，各准确加入1mL铁标准工作溶液、1mL盐酸羟胺溶液，摇匀。再分别加入0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.5mL和2.0mL邻二氮菲和5mLNaAc溶液，用水稀释至刻度并摇匀。放置10min后，用1cm比色皿，以蒸馏水为参比，在选择的波长下测定各溶液的吸光度。以邻二氮菲的体积为横坐标、吸光度A为纵坐标绘图，并在曲线拐点处用切线法找到交点，确定显色剂的最适宜用量及其络合比。
4、显色时间的选择
用吸量管移取1mL铁标准工作溶液，置于50mL容量瓶中，1mL盐酸羟胺溶液，摇匀，再加入2.0mL邻二氮菲和5mLNaAc溶液，用水稀释至刻度并摇匀。立即用1cm比色皿，以蒸馏水为参比，在选择的波长下测定各溶液的吸光度。然后依次测量放置5min、10min、30min、60min、120min甚至更长时间的分光度。以时间t为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A与t关系的显色时间影响曲线，确定铁与邻二氮菲显色反应完全所需要的适宜时间。
5、铁含量的测定
（1）标准系列溶液的配置及测定
在6个50mL容量瓶中，用吸量管分别准确加入0、2.0mL、4.0mL、6.0mL、8.0mL、10.0mL铁标准溶液（10μg/mL），各加入1mL盐酸羟胺溶液，摇匀。再加入2mL邻二氮菲、5mLNaAc溶液，用水稀释至刻度，摇匀。放置10min，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在所选择的波长下测定各溶液的吸光度。以铁的浓度c为横坐标，吸光度A为纵坐标绘制标准曲线并计算摩尔吸光系数εmax。
（2）试样中铁的含量的测定
准确吸取适量待测水样于50mL容量瓶中，按照标准曲线的绘制步骤（可以和绘制标准曲线同时进行）加入各种试剂，然后测定吸光度A。记录各试液的A值，在标准曲线上查出试液中铁的含量（单位用μg/mL）。可用计算机绘制和计算。
