本标准适用于食品中苏丹红染料的检测。

一、方法原理    

样品经溶剂提取、固相萃取净化后，用反相高效液相色谱—紫外检测器进行色谱分析，采用外标法定量。

二、主要仪器设备            

1. 上海仪电分析LC210高效液相色谱仪，带紫外检测器

2. FA2004电子天平

3.超声波水浴

4.旋转蒸发仪

5.匀浆机

6.离心机

三、试剂

1.乙腈：色谱纯

2. 磷酸：分析纯 

3. 甲醇：色谱纯

4.标准物质：苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ；纯度≥95%

5.苏丹红标准储备液：准确称取适量苏丹红标准物质，用乙腈配制成10 μg/mL的标准贮备液。

四、操作步骤

1、样品制备

具体前处理方法参考国家标准GB/T19681-2005。

2、高效液相色谱仪参考条件

色谱柱：C18 4.6 mm(i.d)×250mm，5μm；

梯度程序： 

流动相A: 乙腈 

流动相B: 0.2 % 磷酸水溶液

流速：1 mL/min；

柱温：40℃

波长：518 nm；

测定：取相同体积试样制备液和标准使用液分别注入高效液相色谱仪，根据保留时间按定性，外标峰面积法定量。

3、结果计算

试样中苏丹红的残留量按下式进行计算。

X=C*V/M

  式中：

 X——样品中苏丹红的残留量，单位为毫克每千克mg/kg；

C——由标准曲线得出的样液中苏丹红的浓度，单位为微克每毫升μg/mL；

V——样液最终定容体积，单位为毫升mL

M——样品质量，单位为克g；

4、备注：

参考色谱图：

2.5 μg/mL苏丹红标准混合溶液