一、原理

    在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关系。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解。其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计测定吸光度随时间的变化值，计算抑制率，通过抑制率可以判断出样品是否含有有机磷和氨基甲酸酯类农药的存在。

二、应用仪器

分光光度计、电子天平、烧杯等

三、分析步骤

1、样品处理

选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加5ml缓冲液，震荡1~2min，倒出提取液，静止3~5min待用。

2、测定

   对照溶液测定：先于试管中加入2..5mi缓冲液，再加入0.1ml酶液，0.1ml显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上（每批样品的控制时间应一致）。加入0.1ml底物，此时溶液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3分钟的吸光度变化值ΔA₀

样品测试：先于试管中加入2..5ml样品提取液，其它操作与对照溶液测试相同，记录反应3分钟的吸光度变化值ΔA_t

3、结果计算

抑制率%＝［(ΔA₀-ΔA_t)/ ΔA₀］×100%

式中：ΔA₀--------对照溶液反应3min吸光值的变化值；

      ΔA_t-------样品溶液反应3min吸光值的变化值；

4、结果判定

当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有有机磷或氨基甲酸酯类农药存在。抑制率≥50%的样品需重复检验2次以上。

对抑制率≥50%的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。

应用流程图如下：