银杏叶为银杏科植物银杏的干燥叶。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法,以槲皮素、山奈素、异鼠李素为对照,测定总黄酮苷的含量。
2005版《中国药典》银杏叶含量测定项下:
1、色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)为流动相;检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计算应不得低于2500。
2、供试品溶液的制备
取本品中粉约1g,用十分之一电子天平精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷回流提取2小时,弃去溶剂,药渣挥干,加甲醇回流提取4小时,提取液蒸干,残渣加甲醇-25%盐酸溶液(4:1)混合液25ml,加热回流30分钟,放冷,转移至50ml量瓶中,并加甲醇至刻度,摇匀,即得。
用HPLC法测定银杏叶总黄酮苷的含量时,常用的流动相系统为甲醇-磷酸系统。
3、其他测定
测定银杏叶片剂总银杏黄酮的含量,采用高效液相色谱仪色谱柱为Hypersil ODS 柱(205mm×4.6mm,5μm);流动相:磷酸缓冲液(pH2)-四氢呋喃-甲醇-异丙醇(60:15:10:15);检测波长380nm.
用反相高效液相色谱法测定银杏叶中槲皮素、异鼠李素、山萘酚等6种黄酮成分的含量,采用高效液相色谱仪色谱柱为ZorbaxODS C18 柱(150mm×4mm,5μm);流动相:A.MeOH, B.四氢呋喃(THF)-H2O-HCOOH(34:65:1),梯度洗脱;;检测波长350nm;柱温25℃。以单酚酸B(salvianolic acidB)为内标。银杏叶用丙酮和盐酸混合溶液回流提取。
以超临界流体萃取(SFE) 银杏叶粗提物中槲皮素和山奈素, 以胶束电动毛细管色谱法(MECC) 测定这两种成分的含量。SFE条件:压力42mPa;温度60℃;改性剂0.2ml乙醇;动态萃取体积4ml;静态萃取时间4min;接收液乙醇。胶束电动毛细管色谱条件:空心熔融石英毛细管柱(55cm×75μm);电压18kV;缓冲液的终浓度25mmol/L NaH2PO 46.25mmol/L-Na2B4O7;SDS 35mmol/L;pH8.5;温度29℃;检测波长254nm;进样时间8s。