黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，主要由黄曲霉寄生曲霉产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。
1. 试用范围
牛奶，奶粉，发酵乳，干酪，奶油等乳制品
2. 方法原理
黄曲霉毒素M1易溶于极性溶剂，因此均匀基质中的黄曲霉毒素M1可以通过甲醇/水震荡分散提取，对于高脂肪/油含量的样品基质加入正己烷予以脱脂。本方法采用免疫亲和柱净化，荧光检测器测定乳制品中黄曲霉毒素M1。
3. 所需设备和耗材
黄曲霉毒素免疫亲和柱
高效液相色谱仪带荧光检测器
水平振荡器
SPE转接头及50ml大容量上样器
电子天平（精度0.02 g)
SPE装置带抽真空系统
黄曲霉毒素M1标准品
PBS 缓冲溶液：称取1.16 g Na2HPO4，0.20 g KH2 PO4，8g NaCl和0.2 g KCl 溶于900ml水中，用HCL或NaOH调节pH至7.4，然后定容至1000ml；
甲醇（色谱纯）
乙腈（色谱纯）
正己烷（分析纯）。
4. 样品前处理
牛奶样品
1. 称取25g(精确至0.01g)混匀的样品，置于50 mL具塞离心管中，水浴加热至35℃～37 ℃，6000 r/min下离心10min。收集全部上清液，待净化；
2. 发酵乳(包括固体状、半固体状和带果肉型)
3. 称取25g(精确至0.01 g)混匀的样品，用0.5mol/L的NaOH溶液调节pH值至7.4，9500r/min下均质5min，水浴加热至35℃～37℃，6000 r/min下离心10min。收集全部上清液，待净化。
4. 乳粉和粉状婴幼儿配方乳制品
5. 称取10g(精确至0.01 g)样品置于250 mL烧杯中，加入50mL约50 ℃的水于乳粉中，玻璃棒搅拌均匀。溶解后冷却至室温，移入100 mL容量瓶中，水洗烧杯并转移洗涤液，用PBS定容至刻度后装入离心管6000转/分钟下离心15 min，混合上清液，取50mL上清液待净化。
干酪
切取均质的样品5g(精确至0.01 g)于50 mL离心管中，加2mL水和30 mL甲醇，9500 r/min下匀浆5 min，超声提取30min，6000r/min下离心10 min。收集上清液并移入250 mL分液漏斗中，同时加入30 mL正己烷，振摇2 min，分层后，弃去正己烷层。重复用正己烷提取2次。提取液减压浓缩至约2 mL，转移浓缩液至离心管，烧瓶用甲醇-水溶液(1+4)5 mL分2次洗涤并倒入50mL离心管中，加PBS溶液稀释至50 mL，6000r/min下离心5min，上清液待净化。
奶油
称取5g(精确至0.01g)试样，置于50 mL烧杯中，用20 mL正己烷将其溶解并移于250mL具塞锥形瓶中。加20 mL水和30 mL甲醇，振荡30min后，将全部液体移于分液漏斗中，待分层后，将下层溶液全部移到100 mL圆底烧瓶中，旋转蒸发仪减压浓缩至约5 mL，加PBS稀释至约50mL，待净化。
5. 免疫亲和柱净化
1. 将IAC装于固相萃取装置上，接上大体积上样器，10ml PBS溶液活化柱子，流速保持在2–3 ml/min，确保上样前柱子保留少量（0.5ml）的PBS溶液，活化液不收集；
2. 将待净化液加入免疫亲和柱，流速不超过5 mL/min，不收集流出液；
3. 用约20ml去离子水淋洗柱子，流速不超过5 mL/min，抽真空1分钟，不收集流出液；
4. 用1.5ml甲醇洗脱，流速控制在1d/s，收集洗脱液过膜后上机测试。
注：免疫亲和柱从冰箱去除需升到室温后使用
6. 色谱条件
色谱柱： Ultimate? XB-C18 250 mm x 4.6 mm，5μm（上海月旭提供）
预柱： Ultimate? C18，5μm，ULT5BG18（上海月旭提供）
流动相： 水:甲醇:乙腈=11:4:5
柱温： 35℃
检测波长： 发射波长：365nm，激发波长：450nm
进样量： 100μL
