可见分光光度计的操作步骤具体如下:
一、开机
开机前将样品室内的干燥剂取出,确认电源是否连接。打开仪器电源开关,等待仪器自检通过,自检过程中禁止打开样品室。
二、使用
仪器自检结束后(7个自检项目均出现OK字样),按[MAIN MENU]键(主菜单),屏幕显示如下5个功能项: 1. Phtometry(定量运算);2.WavelengthScan(波长扫描模式);3.Time Scan(时间曲线扫描);4.System(系统校正);5.Datadisplay(光度直接测量模式)。按相应选项前的数字键,即可进入该选项的下一级子菜单。
1.Phtometry(定量运算)
1)按[MAIN MENU]键,再按数字[1]键进入Phtometry子菜单下,选中对应的数字来选择所需的测定方式:①%T/ABS(透过率/吸光度测定模式);②Ratio(比例测定模式);③Concentration (浓度测定模式或标准曲线模式);
2)按数字[1]键进入%T/ABS(透过率/吸光度测定)子菜单,选中对应的数字键来设定测定条件:①NUM WL(设定测试波长的数目,最多可设定6个不同波长);②WL Setting(设定测试波长具体数值)③DataMode(选择测定吸光度或透光率),设定完毕后点击[Enter]键确定,所有项目设定完毕后按数字[0] 键确定,等待仪器调整至准备状态,此时屏幕上出现AUTOZERO,将盛有空白溶液的比色皿放入样品室中,按[Start/Stop] 键进行零点的自动调整,自动调零完成后,将样品置于光路中,再按[Start/Stop] 键进行测量,仪器的显示屏自动给出对应波长的数值。
3)按数字[3]键进入③Concentration (浓度测定模式或标准曲线模式),选中对应的数字来设定条件(波长数目,波长数值,标准溶液数目及浓度),设定完毕后点击[Enter]键确定,所有项目设定完毕后按数字[0]键确定,等待仪器调整至准备状态,此时屏幕上出现AUTOZERO,将盛有空白溶液的比色皿放入样品室中,按[Start/Stop] 键进行零点的自动调整,自动调零完成后,将标准溶液置于光路中,按照浓度从低到高顺序依次按[Start/Stop] 键进行测量,测量完毕后仪器将自动给出标准曲线,标准曲线下方有三项供选择:①Process(更改标准曲线的坐标和观察浓度回归曲线的数据);②Measure(直接进入样品的测量);③Print(打印浓度回归曲线谱图和数据),选中对应的数字就可执行相应的功能。
4)如果希望返回上一级菜单,按[CLEAR RETURN] 键返回,返回主菜单直接按[MAINMENU]键。
2.Wavelength Scan(波长扫描模式)
1)参数修改:按[MAIN MENU]键,再按数字[2]键进入②Wavelength Scan(波长扫描模式)子菜单下,选中对应的数字来选择所需修改的内容, 修改扫描的起始波长,测量模式,图谱坐标的上下限,扫描速度等等。修改完毕按数字[0]键确定。
2)波长扫描:分别将两个比色皿装上空白溶液和样品溶液,放入比色槽中,按[Start/Stop]键进行谱图扫描(如想终止扫描再次按按[Start/Stop]键),待仪器自动进行基线校正,提示拉入样品自动测试,测试完毕后有扫描图谱出现,下方有相应的数据处理选项①Process②Baseline③Print;
3)数据处理:按数字[1]键进入①Process(数据处理),可以读峰谷值,修改坐标,显示所有数据,求一阶倒数等等功能。
3.TimeScan(时间曲线扫描)
同上(二)操作。
4.System(系统校正)
一般不做。
5.Datadisplay(光度直接测量模式)
同上(二)操作。
三、关机
将比色皿中的溶液倒尽,然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净;关电源将干燥剂放入样品室内,盖上防尘罩,做好使用登记,得到管理老师认可方可离开。
四、注意事项
1.开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2.比色皿内溶液以皿高的2/3~4/5为宜,不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁,池壁上液滴应用擦镜纸擦干,切勿用手捏透光面。测定紫外波长时,需选用石英比色皿。
3.测定时,禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上,如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏,要尽可能及时清理干净。
4.实验结束后将比色皿中的溶液倒尽,然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净,倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内,盖上防尘罩,做好使用登记,得到管理老师认可方可离开。
五、问题处理
1、如果仪器不能初始化,关机重启;如不成功,请向管理老师反映。
2、如果吸收值异常,依次检查:波长设置是否正确(重新调整波长,并重新调零)、测量时是否调零(如被误操作,重新调零)、比色皿是否用错(测定紫外波段时,要用石英比色皿)、样品准备是否有误(如有误,重新准备样品)。