目 次
1.仪器的工作原理和用途
2.仪器的主要技术指标、规格及特点
3.仪器的工作环境
4.仪器的光学原理
5.仪器的使用
6.仪器的维护
7.线性回归方程计算程序的应用
8.仪器的调校和故障分析
9.仪器的成套性
1 仪器的工作原理和用途
分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物质对光的吸收是
具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而
减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理——比耳定律。
t=I/I0
logI0 /I=KCL
A=KCL
其中:t——透射比 I0——入射光强度
I——透射光强度 A——吸光度
K——吸收系数 L——溶液的光径长度
C——溶液的浓度
从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时,透射光是根据溶液的浓度而变化的,
UV754N紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述之物理光学现象而设计的。
UV754N紫外可见分光光度计能在紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的分析。该仪器可广泛地
应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等部门,是理化实验室常用的分析仪
器之一。
2 仪器的主要技术指标、规格及特点
2.1技术指标、规格
2.1.1仪器类别:B类
2.1.2光学系统:单光束、衍射光栅。
2.1.3显 示:2′20字LCD显示
2.1.4波长范围:200nm~800nm。
2.1.5光 源:DD2.5A氘灯,卤钨灯12V30W。
2.1.6接收元件:光电池。
2.1.7波长准确度:±2nm。
2.1.8波长重复性:≤1nm。
2.1.9光谱带宽:4nm。
2.1.10杂光:≤0.5%t(在220nm、340nm处)。
2.1.11透射比测量范围:0.0%t~200.0%t。
2.1.12吸光度测量范围:-0.301A~2.000A。
2.1.13浓度直读范围:0000~3999。
2.1.14透射比准确度:±0.5%t(以NBS930D测试)。
2.1.15透射比重复性:≤0.2%t。
2.1.16噪声:100%噪声≤0.3%t,0%噪声≤0.2%t。
2.1.17稳定性:亮电流≤0.5%t/3min,暗电流≤0.2%t/3min。
2.1.18打印:外接高速热敏打印机
2.1.19电源:AC220V±22V, 50Hz±1Hz。
2.1.20外型尺寸:570mm′400mm′260mm。
2.1.21净重:30kg。
2.2 产品特点
2.2.1 通过LCD显示可直接显示测量数据和当前比色皿的位置,使测量一目了然。
2.2.2 自动调整“0”和“100”,可直接消除比色皿配对的误差。
2.2.3通过功能键的设定可通过打印机进行数据打印和时间间隔打印(动力学测定)。
2.2.4 通过键盘输入可直接进行浓度直读和浓度线性回归的运算,并通过打印机
将测试数据打印。
3 仪器的工作环境
3.1 仪器应安放在干燥的房间内,环境温度为5℃~35℃,相对湿度不超过85%。
3.2 使用时放置在坚固平稳的工作台上,且避免强烈的震动或持续的震动。
3.3 室内照明不宜太强,且避免直射日光的照射。
3.4 电扇不宜直接向仪器吹风,以免因气流影响仪器的正常使用。
3.5 尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。
3.6 供给仪器的电源电压为AC220V±22V,频率为50Hz±1Hz,并必须装有良好的接地线。推荐使用交流稳
压电源,以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为500W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。
3.7 避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀气体的场所使用。
4 仪器的光学原理
UV754N紫外可见分光光度计采用光栅自准式色散系统和单光束结构光路,布置如图:
1——聚光镜 2——滤色片 3——钨卤素灯 4——进狭缝
5——反射镜 6——准直镜 7——光栅 8——出狭缝
9——聚光镜 10——样品架 11——光门 12——光电池
13——氘灯
图 UV754N紫外可见分光光度计光学原理
氘灯、钨卤素灯发出的连续辐射光经滤色片选择后,由聚光镜聚光后投向单色器进狭缝,此狭缝正好于聚光镜及单色器内准直镜的焦平面上,因此进入单色器的复合光通过平面反射镜反射及准直镜准直变成平行光射向色散元件光栅,光栅将入射的复合光通过衍射作用形成按照一定顺序均匀排列的连续的单色光谱,此单色光谱重新回到准直镜上,由于仪器出射狭缝设置在准直镜的焦平面上,这样,从光栅色散出来的光谱经准直镜后利用聚光原理成象在出射狭缝上,出射狭缝选出指定带宽的单色光通过聚光镜落在试样室被测样品中心,样品吸收后透射的光经光门射向光电池接收。
5仪器的使用
5.1 开机
在第一次使用仪器前,先按仪器附件备件清单检查仪器的所有附件备件。在使用之前应先确认仪器的工作电源,将打印机连接至主机,检查仪器样品室应无有遮挡光路的物品,将样品比色皿架推至底。确认后先开启打印机的电源,然后开启主机电源。显示如下。
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6 仪器的维护
6.1 当仪器停止工作时,应关闭仪器电源开关,再切断电源。
6.2 为了避免仪器积灰和沾污,在停止工作的时间里,用防尘罩罩住仪器,同时在罩子内放置数袋防潮剂,以免灯室受潮、反射镜镜面发霉或沾污,影响仪器日后的工作。
6.3 仪器工作数月或搬动后,要检查波长准确度,以确保仪器的使用和测定精度。
注 意
每次使用仪器后应对比色皿架进行清洁,防止样品对比色皿架的腐蚀。
7 线性回归方程计算程序的应用
UV754N型紫外可见分光光度计,在日常分析中,只要将标准系列溶液和相应测出的吸收光度值分别输入,仪器即能建立线性回归方程C=KA+B并将此方程式以及反映浓度C和吸光度之间线性关系的相关系数R打印成表式以供使用。如果随即测定样品,则可由仪器打印出样品液的吸光度A或浓度C,保存此表,日后在相同条件下测定相同样品液时只需将表中回归方程式的K和B值输入仪器,则又建立了浓度计算表。不需再作标准曲线或另计算其回归方程式或相关系数。
例如:我们用甲基准重铬酸钾配置成S1:10.6μg/mL,S2:21.3μg/mL,S3:50.3μg/mL系列标准溶液,R用水作参比液,在UV754N型紫外可见分光光度计上,测定波长为450nm绘制线性回归方程,其结果见表1,如需测定未知样品,则可直接读出浓度值,浓度单位与标样相同为μg/mL。
日后在相同条件下测定相同样品时,只需将表1中回归方程式中K,B值输入仪器。则又建立了浓度计算表,可直接测定样品的吸光度及浓度值。见表2。
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8 仪器的调校和故障分析
仪器使用较长时间后,仪器的性能指标有所变化,需要进行调校或修理,现简单介绍,以供参考。
8.1 钨卤素灯的更换
光源灯是易损件,当损坏件更换或由于仪器搬运后均可能偏离正常的位置,为了使仪器有足够的灵敏度,正确地调整光源灯的位置则显得更为重要,在更换光源灯时应戴上手套,以防止沾污灯壳而影响发光能量。
UV754N紫外可见分光光度计的光源灯采用12V30W插入式钨卤素灯,更换时应先切断电源,然后用附件中的扳手旋松灯架上的两个紧固螺钉,取出损坏的钨卤素灯,换上新灯,将仪器的波长置于500nm处,开启仪器电源,移动灯上、下、左、右位置,直到成象在进狭缝上。在t(T)状态,不调满度/调零键,观察显示读数,调整灯使显示读数为最高即可。最后将两个螺钉旋紧。
8.2 氘灯的更换
UV754N紫外可见分光光度计采用DD2.5A氘灯,更换时应先切断电源,然后旋松氘灯灯架上的紧固螺钉,取出损坏的氘灯,换上新灯,注意氘灯的接线位置,将仪器的波长置于200nm处,开启仪器电源,移动灯上、下、左、右位置,直到成象在进狭缝上。在t(T)状态,不按调满度/调零键,观察显示读数,调整灯使显示读数为最高即可。最后将螺钉旋紧。
注 意
两个紧固螺钉为钨卤素灯电源的输出电压端,当灯点亮时,千万不可短路,否则,将损坏灯电源电路元件。氘灯的更换请注意接线的位置。刚使用过的钨卤素灯、氘灯更换,请注意烫手。氘灯不可长时间的观看。
8.3 波长准确度校验
UV754N紫外可见分光光度计采用镨钕滤光片529nm、808nm两个特征吸收峰(需经标定),通过逐点测试法来进行检定及校正。
本仪器分光系统的采用光栅作为色散元件,其色散是线性的,因此波长分度的刻度也是线性的。当通过逐点测试法记录的刻度波长与镨钕滤光片特征吸收波长值超出误差时,则可卸下波长手轮,旋松波长刻度盘上的三个定位螺钉,将刻度指示置特征吸收波长值,旋紧螺钉即可(误差应不超过±2nm)。
8.4 故障分析
故障现象 | 故障原因 | 排除方法 |
1.开启电源开关,仪器无反应 | 1.电源未接通。 2.电源保险丝断。 2.仪器电源开关接触不 良。 | 1.检查供电电源。 2.更换保险丝。 2.更换仪器电源开关。 |
2.显示不稳定 | 1.仪器预热时间不够。 2.环境振动过大,光源附近气流过大或外界强光照射。 2.电源电压不良。 3.仪器接地不良。 | 1.保证开机时间20min。 2.改善工作环境。
2.检查电源电压。 3.改善接地状态。 |
2.调不到0% | 1.光门卡死。 2.放大器坏。 | 1.修理光门。 2.修理放大器。 |
3.调不到100% | 1.钨卤素灯、氘灯不亮。
2.光路不准。 2.放大器坏。 | 1.检查灯电源电路(修理)。 2.调整光路。 2.修理放大器。 |
5.浓度计算失准 | 1.显示板坏。 | 1.修理或更换显示板。 |
9 仪器的成套性
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注:上海仪电分析UV754N紫外可见分光光度计使用说明书 http://pan.baidu.com/s/1kVix52n