高效液相色谱仪的日常维护如下:
1、所有流动相必须过滤和超声
若流动相为有机系和水系时必须分别对其过滤后混合到一起超声,有机相超声15分钟,水系超声20分钟,混合到一起超声15分钟。
2、泵头单向阀污染清洗
长期使用仪器或流动相被污染时极易使单向阀污染。
单向阀污染判别:将在线过滤头提离流动相液面,将放空阀旋钮拧松,运行泵。此时在入液官中进入一气泡,马上将在线过滤头放入流动相内,然后将放空阀旋纽拧紧,以观察气泡行程:
a.若气泡往前走又向后退,说明下单向阀污染,将下单向阀取下后放入丙酮中超声即可(超声时要让单向阀保持坚直状态)。
b.若气泡往前走,但行程比防空阀旋纽拧松时慢,说明上单向阀污染,即将上单向阀取下后放入丙酮中超声即可(超声时要让单向阀保持坚直状态)。
3、泵头清洗
位于泵头后部的两根四氟液路管为清洗管,若流动相中含有盐类物质时,必须对泵头进行清洗。
清洗步骤如下:
a.将一根清洗管放入到过滤过的蒸馏水瓶放在高处。
b.用针管吸另一根清洗管党有水滴出时将其放在一空瓶中,空瓶放在低处。
c.在实验过程中一直对泵头进行清洗直到实验完成。
4、若泵运行中压力突然上升,说明液路有堵的地方。检验方法遵循从后往前原则,逐段拆下后,若压力下降说明此段堵塞,逐个更换即可。
5、安装单向阀时要确保方向正确。
6、泵的流量校正值不能随意改动。
7、若柱的填充物为C18,流动相为水+盐时,在做实验的过程中必须同时用蒸流水清洗泵头。作完试验后,将流动相换为水以0.7mI/min走柱子40分钟后,再换用甲醇为流动相以0.7mI/min走柱子30分钟。在下次流动相仍为水+盐时,应先用蒸馏水走柱过渡,在换成流动相为甲醇+水+盐时,在作试验的过程中必须同时用蒸馏水清洗泵头。做完实验后,将流动相换为水以0.7mI/min走柱子40分钟后,再换用甲醇为流动相以0.7mI/min走柱子30分钟后。在下次流动相仍为水+盐时,应先用蒸馏水走柱过渡,再换成流动相为甲醇+水,作完试验后,换用甲醇为流动相以0.7mI/min清洗柱子30分钟。
8、当换为正相柱时,必须先用异丙醇清洗液路管一小时后,再换为正相流动相走液路二十分钟后换上正相柱作实验,试5验完后用正己烷清洗柱子。
9、当液路中存在气泡时,检测起的吸收值会显示有很大的跳动,同时工作站的基线会呈现不稳的情况;这时先检查整个系统有无漏液的地方,如没有再把流通池进液口和出液口的螺钉拧 ,防止密封不严造成漏气。在系统已经进气的情况下,先把流动相进行超声除气;另外在检测器的出液端反压管上间歇性的加反压,这样可以把流通池中的气泡排出。
10、在工作站上的基线如果呈现上下跳动的情况,但是检测器的吸收值没有很大的变化,可能是修改检测器中“RNG”的设置值,此设置值出厂时为“1”;当已经修改需要调整回初始值时,可以先按检测器的键盘上的“RNG”键,在“RNG”菜单界面内将光标移向数值出,连续按数字“1”.“3”,即可将“RNG”值修改
为“1”。