选购紫外可见分光光度计时要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑,主要考虑光学构造、光源、探测方法、样品类型和数据处理等因素。
一、光学构造
一般来说,紫外可见分光光度计分为单光束和双光束两类。
顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量,束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。
双光束型则是通过一个斩光轮将束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以小化光漂移和减少测量时间。有些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用种光束分光器来代替,将束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。
二、光源和检测方法
紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。钨灯和卤素灯般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm),而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。
分光光度计的光谱也是需要考虑的个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。
分光光度计的带宽很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度,可以投射出实验准确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量,可变的单色仪的狭缝宽度能使台分光光度计满足多种实验需要。
为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管和光敏二管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。
三、样品类型
在大部分的样品类型中,紫外分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。用小试管cuvette装样品容量般从1 μl-5ml,并且些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。